开展分子生物学实验, 核酸电泳属于基本功, 提及核酸染料, 大家或许首先会想到EB, 可是鉴于毒性方面的问题, Green系列染料成为众多实验室的首选替代物, 它不但能够灵敏地显现DNA条带, 而且相对较为安全, 进行操作时也更加便利, 然而, 市场上Green染料各种各样, 浓度、兼容性都不一样, 选错了不但会造成金钱浪费, 还可能对实验结果产生影响, 今天就来谈论一下如何挑选正确的Green染料, 以及使用过程中有哪些容易踩到的坑。
核酸染料green哪个牌子好
选品牌之际, 不可仅瞅广告, 得瞧实际数据。某些进口大牌价高, 然而批次稳定性着实佳；某些国产新兴品牌性价比超高, 针对常规教学或者初步筛选实验全然够用。重点在于你要确定该染料是否与你的电泳缓冲液相兼容。比如说TAE和TBE缓冲液对染料的溶解度以及结合效率存在影响, 部分染料于低离子强度下信号较弱。建议先进行小规模试用, 观察背景噪音以及条带清晰度。重点对染料的激发光谱予以关注, 保证能够与你的凝胶成像系统相契合, 防止在买回来之后察觉到荧光信号太过微弱。
核酸染料green怎么用才安全
尽管Green染料相较于EB存在着较高的安全性, 不意味着它能够毫无顾忌地被随意丢掉或者由人直接徒手拿取接触, 然而大多数该种染料依旧有着导致突变的特性, 只是所具备的程度比较低罢了。在进行操作期间, 务必得佩戴适宜的手套以及合适的口罩, 并且要选在专门设定的用来处理的区域开展相关工作。关于具体的染色办法, 主要存在着两种方案存在: 第一种是在用于实验的凝胶里提前预先进行调配再进行混合染液的操作, 第二种是在电泳结束之后进行浸染的操作。预先混合的办法效率比较高, 不过需要给予特别的留意, 染料的浓度要是过高的情形下会致使条带拖尾表现出不良状况；浸染的办法对DNA所造成的损伤比较小, 仅仅是所耗费的时间会比较长而已。不管是选用哪一种办法，实验完过后剩余的废液均不可以直接倾倒进下水道之中去排放, 一定要收集起来并且按照针对化学废弃物的处理方式进行妥善处理。在实验期间所产生的吸头, 还有手套之类的物品, 同样是需要进行分类回收的, 必须得严格去遵守实验室生物安全方面的规范, 以此来保护自身安全的同时也能够保护环境。
