于分子生物学范畴以及临床检验领域当中, 核酸分子杂交属于一项处于基础地位的技术, 这技术凭借碱基互补配对的准则之事由, 致使单链的DNA或者属于RNA的物品去寻觅并且结合特定的目标序列对象, 此技术在核心方面就是关于“探针”与“靶标”的具有特性的结合行为, 借此达成对遗传类信息的精确检测目的, 不管是基因诊断方面, 还是法医学鉴定方面, 又或者是基础科研里的基因表达分析方面, 杂交技术均发挥着具备不可替代性质的职责作用, 弄明白不同种类的杂交方式情况, 对利于我们更为准确地开展选择实验方案的行动, 提升检测的灵敏程度以及具有特性的程度。
用于核酸杂交分析的Southern Blotting, 和同样用于核酸杂交研究的Northern Blotting, 二者之间存在着怎样的区别呢?
常存在不少容易将这两种经典印迹杂交技术弄混淆的人, 然而它们针对的对象有着极大不同。Edwin Southern所发明的Southern Blotting, 是专门用来检测DNA片段之物。于实验里, 基因组DNA经限制性内切酶切割后, 借由凝胶电泳进行分离, 随后转移至膜上, 最终用标记的探针施以杂交。该方法常常被用于基因拷贝数分析、基因重排检测以及转基因个体的筛选。因操作繁杂, 且耗费时间比较长, 它在日常临床诊断里, 已然逐渐被PCR技术给取代了? 但这在法医物证以及个人身份识别方面具备重要价值。
在进行比较的情形之下, Northern Blotting是被用于对RNA予以检测的, 它主要是被运用在对于基因的表达水平展开研究方面的, 借助于把总RNA或者mRNA进行分离以及固定处理之后, 当探针与之相结合了就能够反映出特定基因在特定组织或者发育阶段的转录活性, 尽管在近些年来实时荧光定量PCR（qRT-PCR）由于其具备高灵敏度从而成为了主流, 然而Northern Blotting仍然是验证基因表达结果的“金标准”当中的一个, 尤其是在需要对转录本大小加以确认的时候, 它的优势是没有办法被替代的。
斑点杂交与原位杂交的直观应用
斑点杂交作为一种快速筛查手段, 是不需要去进行复杂的电泳分离步骤的, 它是直接把样品点样在尼龙膜或者硝酸纤维素膜上面, 在变性之后与探针进行杂交, 这种方法适宜大数据样本的初步筛选, 像是检测病毒载量或者转基因植物的存在情况, 它的优点在于速度快且成本低, 而它的缺点是缺少片段大小信息, 仅仅能够给出定性或者半定量的结果。
原位杂交是在细胞或者组织切片之上开展的，其保留了空间位置方面的信息, 借助荧光标记或酶标记探针, 能够直接去观察基因于染色体上的位置, 或者在特定细胞类型里的表达分布, 此项技术在病理学研究中非常关键, 能够协助医生判定肿瘤组织中特定致癌基因的表达情形, 为个性化治疗提供相应依据, 不管是荧光原位杂交（FISH）亦或是放射性原位杂交吗, 它们均使得微观的分子事件变得能够通过肉眼看见, 极大地扩充了我们对于生命过程的认知。
